蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

被引：5

作者：

杨俊兴 ^{[1
,2
]}

花群义 ^{[1
]}

陈焕春 ^{[2
]}

卢体康 ^{[1
]}

吕建强 ^{[1
]}

秦智峰 ^{[1
]}

陶红 ^{[1
]}

林庆燕 ^{[1
]}

陈兵 ^{[1
]}

徐聪 ^{[1
]}

郭莹洁 ^{[1
]}

机构：

[1] 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

[2] 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

来源：

中国兽医科学 | 2009年 / 39卷 / 01期

基金：

中国博士后科学基金;

关键词：

蓝舌病病毒; 双抗体夹心ELISA; 单克隆抗体;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2009.01.010

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

用将纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了3株(1F5、4E5和6A1)可以稳定分泌抗BTV VP7特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗。选用抗VP7单抗(1F5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了BTV双抗体夹心ELISA检测方法。用该ELISA方法分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水疱性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品。结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性。用该ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%。该方法的建立为BTV的检测及蓝舌病的流行病学调查提供了有效工具。

引用

页码：50 / 53

页数：4

共 5 条

[1] 猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及其单克隆抗体的制备 [J].