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猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及其单克隆抗体的制备
被引:25
作者:
侯强
彭伍平
孙元
仇华吉
机构:
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
来源:
关键词:
猪瘟病毒;
E2蛋白;
原核表达;
单克隆抗体;
D O I:
10.16656/j.issn.1673-4696.2008.01.005
中图分类号:
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号:
090601 ;
摘要:
利用RT-PCR扩增了猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗株(C株)的E2蛋白主要抗原区(tE2)编码区,并定向克隆到表达载体pPROEX-HTb中,获得重组表达载体pPROEX-tE2,将其转化大肠杆菌DH5α菌株,经IPTG诱导,tE2蛋白获得高效表达;经检测,该重组蛋白能被CSFV C株抗血清识别。用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了1株稳定分泌抗tE2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经检测,该单克隆抗体能够与CSFV C株和石门株以及杆状病毒表达的重组E2蛋白发生特异性反应。推测,该单克隆抗体是针对CSFV E2蛋白的一个保守线性表位。
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