胃癌中P53蛋白转录调控活性的分析及其临床意义

目的探讨P53蛋白转录调控活性在胃癌发生发展中的作用。方法应用双荧光素酶报告基因测试（dual-luciferase reporter assay）检测人类胃癌细胞和正常细胞中p53转录调控活性,并通过逆转录-PCR对细胞中p53全长进行扩增,构建pMD18-T-p53重组质粒测序,检测p53突变对其活性的影响。应用免疫组织化学的方法联合检测P21WAF1/Cipl,Gadd45α,Mdm2三种蛋白在76例胃癌及癌旁组织中表达水平,通过分析它们与肿瘤的临床病理特征及各个分子之间的相关性来间接反应P53在组织中的转录调控活性。结果双荧光素酶报告基因显示p53转录调控活性在正常细胞中明显高于肿瘤细胞,在p53基因发生突变的细胞系MKN28中P53蛋白转录活性最低。免疫组化结果显示P21WAF1/Cip1,Gadd45α,Mdm2在癌旁组织中的表达明显高于肿瘤组织（P<0.05）,且随着肿瘤TNM分期的增高有表达降低的趋势（P<0.05）。P21WAF1/Cipl,Gadd45α,Mdm2之间的相关性分析结果显示3个分子在胃癌组织和癌旁组织中的表达呈正相关（P<0.05）。结论 P53蛋白转录调控活性的变化在胃癌的发生发展中起着重要的作用,p53突变可以影响其转录调控活性。P21WAF1/Cipl,Gadd45α,Mdm2联合检测可以作为间接反映P53蛋白转录调控活性的效应分子。