RNA干扰研究波形蛋白在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节

被引：2

作者：

胡卫 ^{[1
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方肇勤 ^{[2
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梁超 ^{[2
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管冬元 ^{[2
]}

吴中华 ^{[2
]}

机构：

[1] 三峡大学医学院

[2] 上海中医药大学基础医学院

来源：

中国实验方剂学杂志 | 2011年 / 17卷 / 20期

关键词：

肝癌; 波形蛋白; 基因芯片; RNA干扰; 治则治法;

D O I：

10.13422/j.cnki.syfjx.2011.20.053

中图分类号：

R285.5 [中药实验药理];

学科分类号：

1008 ;

摘要：

目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌波形蛋白(vimentin,VIM)表达的调控差异,以及VIM在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及实验组,除正常组外均采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)VIM表达的差异;根据人VIM基因编码区设计2个siRNA靶点,并将构建好的重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,Realtime-PCR检测转染前后该基因的表达差异,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况。结果:芯片结果显示,VIM基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加(模型组芯片读数为正常组10倍以上),健脾和活血治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个VIM基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72 h后该基因的表达量明显降低(转染效率为50%)。结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于VIM基因的高表达,健脾和活血方药能显著下调该基因表达。

引用

页码：149 / 153

页数：5

共 6 条

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