目的:建立中成药中雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚4种激素的高效液相检测方法。方法:采用岛津ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(50:50)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长为220 nm,柱温为30℃。结果:4种雌激素均在0~50μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9999);雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚的平均回收率(n=4)分别为100.0%(RSD=2.4%),99.8%(RSD=1.9%),100.0%(RSD=2.6%),100.0%(RSD=1.2%)。结论::建立的HPLC方法具有专属性强、灵敏度高、操作简便、准确性好等特点,可以作为中成药中非法添加激素类化学药品检查的有效方法。