油茶SSR-PCR反应体系的优化研究

被引：23

作者：

范小宁 ^{[1
]}

林萍 ^{[2
]}

张盛周 ^{[1
]}

机构：

[1] 安徽师范大学生命科学学院生物环境与生态安全省级重点实验室

[2] 中国林科院亚热带林业研究所

来源：

安徽农业科学 | 2011年 / 39卷 / 23期

关键词：

油茶; SSR-PCR; 正交设计; 体系优化;

D O I：

10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.23.214

中图分类号：

S794.4 [油茶];

学科分类号：

090702 [森林培育];

摘要：

[目的]优化油茶(Camellia oleifera)SSR-PCR反应体系。[方法]应用改良CTAB法提取油茶基因组DNA,采用L16(45)正交设计试验,对影响油茶SSR-PCR反应体系的5个因素(Taq聚合酶浓度、模板浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Mg2+浓度)在4水平上进行筛选。PCR结果经统计分析软件DPS分析,并对退火温度进行了摸索,确立了油茶SSR-PCR的优化体系。[结果]油茶SSR-PCR的优化体系总体积为20μl,包括Taq聚合酶量为1.0 U/20μl,模板浓度75 ng/20μl,dNTPs浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Mg2+浓度为1.50 mmol/L,退火温度为50℃。[结论]该研究确定的优化体系可以为油茶资源遗传多样性分析奠定技术基础。

引用

页码：14098 / 14102

页数：5

共 17 条

[1]

杏SSR反应体系的优化研究 [J].