赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白的纯化及其活性

被引：4

作者：

于保锋 ^{[1
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刘志贞 ^{[1
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张悦红 ^{[1
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解军 ^{[1
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程牛亮 ^{[1
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王建华 ^{[3
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牛勃 ^{[1
,3
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机构：

[1] 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室

[2] 细胞生理学省部共建教育部重点实验室

[3] 首都儿科研究所

来源：

中国生物制品学杂志 | 2013年 / 26卷 / 05期

关键词：

赤子爱胜蚓; 核酸酶样蛋白; 纯化;

D O I：

10.13200/j.cjb.2013.05.126.yubf.008

中图分类号：

Q51 [蛋白质];

学科分类号：

070307 [化学生物学];

摘要：

目的纯化赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白,并鉴定其活性。方法将制备的赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白粗提液透析后,经Bio-CAD CM柱层析系统非连续梯度洗脱,收集洗脱峰,对有活性的梯度洗脱峰样品进行单向聚丙烯酰胺凝胶电泳(1D-PAGE)及切胶纯化,将切胶回收纯化的蛋白样品进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE),回收蛋白,进行活性和浓度检测。结果透析后的蛋白粗提液经Bio-CAD CM柱层析分离,得到3个不同洗脱梯度的可降解DNA的活性峰,3个梯度蛋白的PAGE带型基本一致,经PAGE分离获得3个核酸酶样蛋白纯品EWD1、EWD2和EWD3,得率和纯化倍数分别为:27.9%,11.6;16.7%,11.2;16.7%,18.6。结论成功纯化了赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白,并保持了其良好的生物活性。该纯化方法简单、快速、经济、实用,为该蛋白结构及功能的进一步研究奠定了基础。

引用

页码：705 / 709

页数：5

共 6 条

[1]

蛋白质电泳实验技术.[M].郭尧君编著;.科学出版社.1999,

[2]

蚯蚓用于抗血栓的加工方法 [J].