低分子壳聚糖的抗肝纤维化作用及其对TLR4表达的影响

目的:阐明低分子壳聚糖(LMCTS)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的抑制作用,探讨其对Toll样受体4(TLR4)表达的影响,为开发临床治疗肝纤维化的天然候选药物奠定基础。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机均分空白对照组、CCl4组(模型组)、甘利欣(DG)组和50、100及150mg·kg-1 LMCTS组(低、中和高剂量组)。除空白对照组外,其余5组大鼠腹腔注射40%CCl4植物油(1.75mL·kg-1),每周2次,共8周;空白对照组大鼠腹腔注射等量100%植物油。从第9周起,DG组及LMCTS组大鼠分别灌胃给予DG和LMCTS(每天1次,共4周)。实验结束后检测各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性,光镜下观察肝组织病理学改变,并采用RT-PCR和Western blotting法检测TLR4表达情况。结果:血清学指标,中和高剂量LMCTS组大鼠血清ALT、AST和ALP活性均低于模型组(P<0.05);与低剂量LMCTS组比较,中剂量LMCTS组ALP活性明显降低(P<0.05),而ALT和AST活性降低不明显(P>0.05);高剂量LMCTS组ALT、AST和ALP活性与中剂量LMCTS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色,模型组大鼠部分肝细胞脂肪变性,有明显的炎性细胞浸润和胶原纤维增生,肝小叶破坏明显,而LMCTS组大鼠肝组织的变化有所减轻。RT-PCR和Western blotting法,与模型组比较,LMCTS组大鼠肝组织中TLR4表达水平降低(P<0.05或P<0.01),以高剂量LMCTS组最为明显,不同剂量组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量LMCTS具有良好的降低肝纤维化大鼠血清转氨酶活性和改善肝纤维化大鼠肝功能的作用,且此过程与TLR4表达水平降低有关。