小白菜苏云金芽孢杆菌CryIB基因的遗传转化

被引：11

作者：

秦新民

高成伟

李春瑶

邓智年

机构：

[1] 广西师范大学生物学系!广西桂林

来源：

广西师范大学学报(自然科学版) | 1999年 / 03期

关键词：

小白菜; 杀虫晶体蛋白基因; 苏云金芽孢杆菌; 农杆菌; 遗传转化;

D O I：

10.16088/j.issn.1001-6600.1999.03.017

中图分类号：

Q785 [转化及克隆]; S634.3 [白菜（小白菜）];

学科分类号：

摘要：

用限制酶ＳｐｈⅠ和ＥｃｏＲⅠ消化质粒ｐＢＹＴＥＳｐ１０１－１和ｐＢＱＸ，将ｐＢＱＸ上的经改造过的苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因ＣｒｙＩＢ取代ｐＢＹＴＥＳｐ１０１－１上的ＧＵＳ基因，得到一个中间克隆ｐＢＩＷＩＱ－１．用限制酶ＨｉｎｄⅢ消化质粒ｐＢＩＷＩＱ－１，回收含ＣｒｙＩＢ基因的５１ｋｂＤＮＡ片段，插入质粒ｐＢＩＮ１９的ＨｉｎｄⅢ位点，构建成具卡那霉素抗性的植物表达载体ｐＢＩＷＩＱ－５．用三亲结合法将质粒ｐＢＩＷＩＱ－５转入农杆菌ＥＨＡ１０５．通过农杆菌介导的方法将ＣｒｙＩＢ基因导入小白菜．ＰＣＲ扩增、Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明：杀虫晶体蛋白基因ＣｒｙＩＢ已整合到小白菜基因组中，并得到表达

引用

页码：77 / 82

页数：6

共 6 条

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