真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4的构建与鉴定

被引：10

作者：

韩雷 ^{[1
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汪春兰 ^{[1
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赵宇 ^{[1
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何金生 ^{[2
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王帮河 ^{[1
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王兴宇 ^{[1
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杨兵 ^{[2
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周志林 ^{[1
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机构：

[1] 安徽医科大学第一附属医院整形外科

[2] 安徽医科大学免疫学教研室

来源：

安徽医科大学学报 | 2007年 / 02期

基金：

安徽省自然科学基金;

关键词：

血管内皮生长因子类/遗传学; 骨形态发生蛋白质类/遗传学; 遗传载体; 基因表达;

D O I：

10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2007.02.004

中图分类号：

R68 [骨科学（运动系疾病、矫形外科学）]; R346 [];

学科分类号：

100220 [骨科学];

摘要：

目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础。

引用

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