铁皮石斛的ITS2条形码分子鉴定及5种重金属及有害元素的测定

被引:22
作者
严华 [1 ,2 ]
石任兵 [1 ]
姚辉 [3 ]
张文娟 [2 ]
李明华 [2 ]
程显隆 [2 ]
余坤子 [2 ]
魏锋 [2 ]
马双成 [2 ]
机构
[1] 北京中医药大学
[2] 中国食品药品检定研究院
[3] 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所濒危药材繁育国家工程实验室
关键词
铁皮石斛; 第二内转录间隔区(ITS2); DNA分子鉴定; 基原鉴定; 微波消解; 电感耦合等离子体质谱; 重金属; 有害元素;
D O I
暂无
中图分类号
R284.1 [化学分析与鉴定];
学科分类号
100804 [中药化学];
摘要
目的:应用DNA条形码技术,从分子水平快速、准确地鉴定我国12个省区铁皮石斛栽培基地铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)及其同属常见植物的基原,采用微波消解ICP-MS技术测定各地铁皮石斛中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)5种重金属及有害元素的含量,评价栽培铁皮石斛的用药安全。方法:提取各样本总DNA,对r DNA的第二内转录间隔区(ITS2区)进行扩增,计算种内、种间Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离,通过与中药材DNA条形码鉴定系统比对和构建N-J(Neighbor-Joining)系统树进行基原鉴定。建立微波消解方法进行样品前处理,ICP-MS法对铁皮石斛中5种重金属及有害元素进行测定,比对国内外现行标准,对铁皮石斛的安全性进行评价。结果:铁皮石斛的ITS2序列长度在246~340bp范围,种内变异较小,种内最大K2P遗传距离为0.009,铁皮石斛及其混伪品的种间平均K2P遗传距离为0.206,种间最小K2P遗传距离明显大于种内的最大K2P遗传距离。经与中药材DNA条形码鉴定系统比对及构建N-J树进行基原鉴定。结果表明ITS2序列可区分铁皮石斛及其近缘种。5种重金属及有害元素的测定结果表明各地的含量差异较显著,但在安全的范围内。结论:ITS2片段DNA条形码可有效鉴定中药铁皮石斛及其常见同属植物的基原,建立的ICP-MS法测定铁皮石斛中5种重金属与有害元素的方法准确、可行,各元素的含量在现行相关标准的安全范围内。
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