H5N1亚型禽流感基质蛋白M1基因的原核表达和纯化

被引:6
作者
储结园 [1 ]
王海军 [1 ]
王春雨 [1 ]
陈迪 [1 ]
王全凯 [2 ]
机构
[1] 吉林农业大学中药材学院
[2] 吉林农业大学国际合作与交流处
关键词
H5N1; 禽流感; 基质蛋白M1; 原核表达; 纯化;
D O I
10.13326/j.jea.2010.01.003
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090507 [智慧养殖与动物生产学];
摘要
为获得纯度大于90%的M1蛋白,构建重组质粒PET-22b-M1,将正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测分析表达形式和表达量,并经Ni2+柱亲和层析与柱层析纯化表达蛋白。结果表明:试验成功构建了pET-22b-M1表达载体;IPTG诱导后高效表达出分子质量约为28 ku的M1融合蛋白;纯化的目的蛋白在SDS-PAGE图谱上呈单一条带,且获得的M1蛋白纯度达95.4%。
引用
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Ihata, A ;
Liu, LJ ;
Honsho, A ;
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Okuda, K .
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Yang, J ;
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Nakazawa, M ;
Okuda, K ;
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Nakajima, K ;
Xin, KQ .
VACCINE, 2001, 19 (27) :3681-3691
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[5]
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[6]
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