人骨形成蛋白-2和骨保护素在小鼠成肌细胞中的共表达

目的　构建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )和骨保护素 (OPG)的共表达真核载体 ,研究其在小鼠成肌细胞C2 C12中的表达。　方法　以人骨肉瘤细胞系 MG6 3的总 RNA为模板 ,RT- PCR法获得人 OPG的编码区 c DNA,克隆入真核表达载体 p IRES2 - EGFP的多克隆位点 ,再将人 BMP- 2的编码区 c DNA克隆入 p IRES2 - EGFP中的 Bst X 位点 ,构建 BMP- 2和 OPG的双顺反子真核表达载体 p IRES2 - BMP- 2 - OPG,在阳离子脂质体介导下转染 C2 C12细胞 ,Western blot法检测 BMP- 2和 OPG的表达。　结果　 1获得人 OPG编码区全长 c DNA。 2构建人 BMP- 2和 OPG的双顺反子真核表达载体 p IRES2 - BMP- 2 - OPG。 3经 Western blot检测 ,p IRES2 - BMP- 2 - OPG转染 C2 C12细胞后 ,细胞可稳定表达 BMP- 2和 OPG。　结论　构建了人 BMP- 2和 OPG的共表达真核载体 ,并可在 C2 C12细胞中稳定表达 ,为应用 BMP- 2和 OPG进行骨质疏松等疾病的治疗研究奠定了基础。