生品与麸炒苍术对脾虚证大鼠小肠吸收转运相关蛋白载体的影响

目的：通过比较生品与麸炒苍术对脾虚证大鼠小肠组织结构及转运相关蛋白载体的影响，探讨麸炒法影响苍术改善胃肠功能的可能机制。方法：雄性SD大鼠70只随机分为正常组、脾虚证模型组(以下简称模型组)、生苍术高、低剂量组、麸炒苍术高、低剂量组、复方谷氨酰胺组，每组10只。除正常组外的6组均以苦寒破气加饥饱失常法复制脾虚模型，造模时间为21 d。完成造模后，各治疗组每天按相应剂量药物灌胃治疗，共计14 d：生苍术高、低剂量组10、2.5 g·kg-1；麸炒苍术高、低剂量组10、2.5 g·kg-1，复方谷氨酰胺组9 mg·kg-1；正常组、模型组给予同体积生理盐水灌胃。治疗期间行脾虚大鼠一般生存状况、宏观证候评分及每日体质量增加量和摄食量、肛温测定，治疗期满后处死大鼠，苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠小肠组织病理学改变，酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清5-羟色胺(5-HT)含量，比色法检测血清D-木糖、乳酸、淀粉酶含量，考马斯亮蓝(Bradford)法检测小肠组织游离脂肪酸受体3(FFA3)、肽转运载体1(PepT1)含量水平，免疫组化法检测小肠组织中钠依赖性葡萄糖转运体1(SGLT1)、葡萄糖转运体1(GLUT1)蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测葡萄糖转运体2(GLUT2)、钠/氢交换因子3(NHE3)、5-羟色胺受体4(5-HT4R) mRNA表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠造模结束时，大部均表现为精神迟钝，眯眼食少，倦怠少动等脾虚证表现，小肠黏膜上皮及固有膜内基本结构被破坏，血清乳酸、5-HT含量升高，血清淀粉酶及D-木糖含量降低(P<0.01)，与模型组比较，各个治疗组一般表现不同程度好转，小肠微观结构不同程度修复，体质量每日增加量、肛温及脾虚宏观证候积分不同程度好转(P<0.05,P<0.01)，血清乳酸、5-HT含量不同程度降低，血清淀粉酶及D-木糖含量不同程度升高(P<0.05,P<0.01)，小肠组织中PepT1含量不同程度升高，FFA3含量不同程度降低，SGLT1、GLUT1蛋白表达不同程度升高，GLUT2、NHE3 mRNA表达不同程度升高，5-HT4R mRNA表达不同程度降低(P<0.05,P<0.01)；与生苍术高、低剂量组比较，麸炒苍术高、低剂量组一般表现及小肠组织病理学改善更为明显，体质量每日增加量、肛温、脾虚宏观证候积分亦有明显改善(P<0.05,P<0.01)；血清乳酸、5-HT含量明显降低，血清淀粉酶及D-木糖含量明显升高(P<0.05,P<0.01)；小肠组织中PepT1含量明显升高，FFA3含量明显降低，SGLT1、GLUT1蛋白表达明显升高，GLUT2、NHE3 mRNA表达明显升高，5-HT4R mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论：麸炒苍术可更好地改善脾虚模型大鼠脾虚相关证候及小肠组织病理学，其机制可能与苍术麸炒后可更好地调节小肠转运相关蛋白载体的表达及各种消化酶的分泌，恢复小肠吸收转运功能有关。