外源乳酸脱氢酶基因在双歧杆菌中的表达

被引:18
作者
李宁军
李琳
江培
李盛翃
黄伟达
机构
[1] 复旦大学生命科学学院生物化学系,复旦大学生命科学学院生物化学系,复旦大学生命科学学院生物化学系,复旦大学生命科学学院生物化学系,复旦大学生命科学学院生物化学系上海 ,上海 ,上海 ,上海 ,上海
关键词
乳酸脱氢酶; 双叉双歧杆菌; 表达;
D O I
10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2002.06.014
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
以大肠杆菌 双叉双歧杆菌的穿梭质粒pHJ为基础,插入从Lactococcuslactis总DNA中用PCR方法扩增得到的报告基因乳酸脱氢酶基因(ldh),构建了双叉双歧杆菌的表达质粒pHJ LDH,并采用电转化法导入双叉双歧杆菌进行了表达研究.对双叉双歧杆菌总蛋白的SDS PAGE分析结果表明,ldh报告基因的表达产物形成了明显的条带,Western blotting结果确认了该条带为ldh基因的产物.LDH的酶活性定量测定结果表明,重组双叉双歧杆菌的蛋白粗抽提液中LDH的比活性为5.5U/mg,菌中LDH的表达量约为2mg/L.此工作为今后双叉双歧杆菌的基因工程奠定了基础.
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