实时荧光定量PCR法分析苦参对大鼠胃肠道大肠杆菌数量的影响

目的:应用实时荧光定量PCR技术分析口服苦参对大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠部位以及粪便内大肠杆菌数量的影响,探索苦参对胃肠道中大肠杆菌菌群调节作用。方法:常规饲养大鼠150只,苦参水煎液分高、中、低剂量灌胃,另设空白对照组与抗生素组各10只。分别在第一、二、三周时采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠各段(含内容物)以及粪便,提取细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR法(绝对定量方法)检测各样本不同给药时间点大肠杆菌的数量。结果:(1)与空白对照组相比较:各给药组十二指肠部位在第一、二、三周时,大肠杆菌数量显著降低(P<0.01);在不同剂量组不同给药时间点,胃部、空肠、回肠部位以及粪便中大肠杆菌数量均有不同程度降低(P<0.05)。(2)与抗生素组比较:低、中、高剂量组给药二周后,十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌数量明显偏低(P<0.05),而结肠及粪便部位在给药一周后高剂量组大肠杆菌数量明显偏高(P<0.01)。结论:苦参水煎液灌胃可造成大鼠十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌菌群数量降低,其中对十二指肠部位大肠杆菌数量的影响随时间推移呈递减趋势,与抗生素的作用基本一致。