羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

被引：5

作者：

李超 ^{[1
]}

赵魁 ^{[2
]}

赵权 ^{[1
]}

贺文琦 ^{[2
]}

宋德光 ^{[2
]}

李晶 ^{[3
]}

解胜男 ^{[2
]}

陈克研 ^{[2
]}

高丰 ^{[2
]}

机构：

[1] 吉林农业大学动物科技学院

[2] 吉林大学畜牧兽医学院

[3] 吉林正业生物制品有限责任公司

来源：

中国兽医科学 | 2010年 / 40卷 / 03期

关键词：

羊传染性脓疱病毒; SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应; 标准曲线;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2010.03.010

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

针对羊传染性脓疱病毒(ORFV)B2L基因序列设计合成了1对引物,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测ORFV核酸的SYBRGreenⅠreal-timePCR方法。结果显示,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系数为0.999;检测灵敏度可达9.4×104copies/μL;与绵羊痘病毒(SPV)不发生交叉反应,具有良好的特异性;组内Ct值相同,组间变异系数小于2%。应用建立的方法检测20份疑似羊传染性脓疱病病料,结果17份为阳性,同时用常规PCR进行检测,结果仅10份为阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可初步用于ORFV的检测。

引用

页码：270 / 273

页数：4

共 6 条

[1]

动物病毒学.[M].殷震;刘景华主编;.科学出版社.1997,

[2] 羊传染性脓疱皮炎病毒研究进展 [J].