甲基强的松龙联合内毒素诱导兔股骨头缺血性坏死的实验研究

目的建立兔激素性股骨头缺血性坏死模型,为进一步研究早期股骨头缺血性坏死的治疗奠定基础。方法健康成年雄性新西兰白兔36只,体重3～4kg,根据给药方式不同随机分成4组。A组(n=10):于耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg/kg),24h后重复给药1次;B组(n=10):大肠杆菌内毒素注射同A组,注射完毕后,立即臀肌注射甲基强的松龙(40mg/kg)3次,每次间隔24h;C组(n=10):单纯臀肌注射甲基强的松龙(40mg/kg)3次,每次间隔24h;D组(n=6):与B组相同时间点注射等量生理盐水,作为对照。注射后观察动物一般情况;于注射前及末次注射后2、4及6周,行MRI检查,观察股骨头改变;6周时通过组织学检查、墨汁血管灌注和透射电镜观察各组股骨头病理和血管形态变化,并计算空骨陷窝率、微血管密度和骨小梁面积百分比,根据组织学和MRI检查结果计算各组骨坏死发生率。结果A、B组动物注射内毒素后出现精神萎靡,眼睑充血发红等症状,活++动及饮食减少。B、C组动物于末次注射后3周明显消瘦,体重减轻;A、D组动物于末次注射后4周体重增加。B、C组分别于末次注射后2d和16d各有1只动物死亡。注射前及末次注射后2周各组动物股骨头MRI信号未见异常。4、6周时B、C组股骨头MRI检查T1WI表现为不规则低信号,T2WI呈高信号或低信号;A、D组股骨头MRI信号未见异常。A、B、C及D组空骨陷窝率分别为11.8%±4.7%、34.4%±6.2%、20.0%±4.7%、9.3%±4.6%;骨小梁面积百分比分别为59.2%±6.8%、40.1%±6.0%、51.5%±5.6%、63.2%±8.3%;微血管密度分别为14.3%±2.7%、4.5%±2.1%、10.2%±3.1%、15.4%±4.1%;各指标B组与A、C及D组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。透射电镜观察,B组和C组骨细胞和内皮细胞胞浆内均出现脂滴,B组骨细胞皱缩,核膜失去连续性、染色质溶解或固缩,A组和B组血管内皮细胞肿胀,细胞之间的连接增宽、破坏。B组骨坏死发生率为88.9%,显著高于C组的22.2%(P<0.05),A、D组无骨坏死发生。结论甲基强的松龙联合内毒素能诱导出典型的兔早期股骨头缺血性坏死模型,成功率高,重复性好。