黄芪甲苷对脂多糖诱导的MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的：探讨黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对脂多糖（LPS）诱导的成骨细胞前体细胞MC3T3-E1氧化损伤的保护作用，阐明其相关机制。方法：将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组和不同浓度(10、25、50及100 mg·L-1)AS-Ⅳ组，采用CCK-8法检测各组细胞活性。将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组、AS-Ⅳ组和AS-Ⅳ+LY294002 [磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路抑制剂]组，采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，采用相关试剂盒检测各组细胞中丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测各组细胞中血红素加氧酶1 （HO-1） mRNA表达水平，采用Western blotting法检测各组细胞中HO-1、 PI3K、磷酸化Akt （p-Akt）、核因E2相关因子2（Nrf2）、B细胞淋巴瘤2 （Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。结果：CCK-8法检测，与对照组比较，LPS组细胞活性明显降低（P<0.01）；与LPS组比较，50和100 mg·L-1AS-Ⅳ组细胞活性明显升高（P<0.01）。与对照组比较，LPS组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）；与LPS组比较，AS-Ⅳ组细胞中ROS和MDA水平明显降低（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显升高（P<0.01）；与AS-Ⅳ组比较，AS-Ⅳ+LY294002组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）。与对照组比较，LPS组细胞中HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）, Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与LPS组比较，AS-Ⅳ组细胞中HO-1mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与AS-Ⅳ组比较，AS-Ⅳ+LY294002组细胞中和HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：AS-Ⅳ可以通过介导PI3K/Akt/Nrf2信号通路对LPS诱导的成骨细胞氧化损伤起到保护作用。