菠萝SRAP反应体系的建立及优化

被引:19
作者
邱文武 [1 ]
孙伟生 [2 ]
窦美安 [2 ]
机构
[1] 华南热带农业大学园艺学院
[2] 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所
关键词
菠萝; SRAP; 体系优化;
D O I
10.16519/j.cnki.1004-311x.2008.01.025
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程]; S668.3 [凤梨(菠萝)];
学科分类号
摘要
目的:建立一种适合菠萝基因扩增的SRAP反应体系。方法:用改良CTAB法提取菠萝DNA,对扩增结果影响重要的反应组分Taq酶、Mg2+、随机引物及dNTPs进行单因素体系优化,以确定最佳菠萝SRAP反应体系。结果:用这种方法建立的菠萝SRAP反应体系为:20μL反应体系中含1×PCR buffer,2.5mmol/L Mg2+、1.2UTaqDNA聚合酶、0.2mmol/L dNTPs、0.3μmol/L随机引物、20ng DNA模板。结论:用引物Me4-Em4组合对供试菠萝19个品种进行扩增,结果扩增条带清晰、丰富、重复性好,此SRAP反应体系适合菠萝基因型扩增。
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