南美白对虾丝氨酸蛋白酶的分离纯化及性质研究

被引:36
作者
翁凌 [1 ]
李腾 [2 ]
阴利华 [1 ]
孙乐常 [1 ]
苏文金 [1 ]
曹敏杰 [1 ]
机构
[1] 集美大学生物工程学院
[2] 上海海洋大学食品学院
关键词
丝氨酸蛋白酶; 南美白对虾; 纯化; 性质分析;
D O I
10.19715/j.jmuzr.2010.04.007
中图分类号
S917.4 [水产动物学];
学科分类号
090805 [渔业资源学];
摘要
通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Hydroxyapatite、Superdex 75等方法,从南美白对虾消化腺中分离得到一种丝氨酸蛋白酶.SDS-PAGE结果显示,其分子质量约为28 ku,最适pH值与最适温度分别为9.0和40℃,且pH值在7.0~10.0之间以及温度在40℃以下有较高的稳定性.底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于类胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶.动力学实验显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,Km=0.69μmol/L,Kcat=0.33 S-1,Kcat/Km=4.78×105(mol/L)-1S-1.
引用
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