苦瓜ISSR-CR反应体系的建立

被引:8
作者
王绪 [1 ]
邓俭英 [2 ]
方锋学 [2 ]
张曼 [2 ]
张玲玲 [1 ]
孙德利 [1 ]
机构
[1] 广西大学
[2] 广西农科院蔬菜研究中心
关键词
苦瓜; ISSR(inter-simplesequencerepeat); 反应体系; 优化;
D O I
10.16590/j.cnki.1001-4705.2007.01.042
中图分类号
S642.5 [苦瓜];
学科分类号
摘要
以苦瓜(M om ordica charan tiaL.)为试材,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对苦瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μl的反应体系中,Mg2+的用量为1.2~1.6 mmol/L,dNTPs浓度为0.2 mmol/L,引物的浓度为0.25μmol/L,Taq DNA聚合酶的用量为1 U,模板DNA的用量为30~50 ng,在46.4~51.7℃的退火温度下35个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。
引用
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