一种基于适配体的快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的方法

被引:7
作者
徐雯 [1 ]
薛婷 [2 ]
余娟 [2 ]
杨振德 [2 ]
韩晓群 [1 ]
俞薇 [1 ]
卢斯霞 [1 ]
廖芳 [2 ]
机构
[1] 武汉市医疗救治中心
[2] 华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系
关键词
P16INK4A; 适配体; 纳米金; 宫颈癌; 筛查; 肿瘤标志物;
D O I
暂无
中图分类号
R737.33 [子宫肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的提出一种可快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的方法。方法构建重组质粒P16INK4A-pET28a,在大肠埃希菌中表达P16INK4A,利用亲和层析纯化,Western blot法验证。以纯化的重组蛋白作靶标,利用指数级富集配体的系统进化技术(SELEX)筛选其特异性适配体,通过分析其亲和力最终选出一条高亲和力、高特异性的适配体。枸橼酸钠还原法制备13nm纳米金颗粒并表征。建立基于免标记纳米金和适配体的分析方法,并对其进行方法学的考察。结果成功表达并纯化了P16INK4A蛋白,筛选出一条抗重组P16INK4A的高亲和力、高特异性的适配体,利用该适配体和免标记的纳米金建立了一种可快速检测宫颈癌标志物P16INK4A的分析方法。结论该方法具有较好的准确度和精密度,有望显著提高早期宫颈癌的检出率。
引用
收藏
页码:667 / 673+677 +677
页数:8
相关论文
共 6 条
[1]   Dual functional RNA nanoparticles containing phi29 motor pRNA and anti-gp120 aptamer for cell-type specific delivery and HIV-1 Inhibition [J].
Zhou, Jiehua ;
Shu, Yi ;
Guo, Peixuan ;
Smith, David D. ;
Rossi, John J. .
METHODS, 2011, 54 (02) :284-294
[2]   Inhibition of HIV transmission in human cervicovaginal explants and humanized mice using CD4 aptamer-siRNA chimeras [J].
Wheeler, Lee Adam ;
Trifonova, Radiana ;
Vrbanac, Vladimir ;
Basar, Emre ;
McKernan, Shannon ;
Xu, Zhan ;
Seung, Edward ;
Deruaz, Maud ;
Dudek, Tim ;
Einarsson, Jon Ivar ;
Yang, Linda ;
Allen, Todd M. ;
Luster, Andrew D. ;
Tager, Andrew M. ;
Dykxhoorn, Derek M. ;
Lieberman, Judy .
JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION, 2011, 121 (06) :2401-2412
[3]   Toward specific detection of Dengue virus serotypes using a novel modular biosensor [J].
Fletcher, Stephen J. ;
Phillips, Lucy W. ;
Milligan, Andrew S. ;
Rodda, Stephen J. .
BIOSENSORS & BIOELECTRONICS, 2010, 26 (04) :1696-1700
[4]   Selection of RNA aptamers against human influenza virus hemagglutinin using surface plasmon resonance [J].
Misono, TS ;
Kumar, PKR .
ANALYTICAL BIOCHEMISTRY, 2005, 342 (02) :312-317
[5]  
Determinants of apical loop–internal loop RNA–RNA interactions involving the HCV IRES[J] . Sonia Da Rocha Gomes,Eric Dausse,Jean-Jacques Toulmé. Biochemical and Biophysical Research Communications . 2004 (3)
[6]   Selection and stabilization of the RNA aptamers against the human immunodeficiency virus type-1 nucleocapsid protein [J].
Kim, SJ ;
Kim, MY ;
Lee, JH ;
You, JC ;
Jeong, S .
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 2002, 291 (04) :925-931