栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测

被引:6
作者
付崇罗
宋微波
李赟
朱明壮
机构
[1] 中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室
[2] 中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室 青岛
[3] 聊城大学生命科学学院聊城
[4] 青岛
基金
长江学者奖励计划;
关键词
栉孔扇贝; AVND病毒; 单克隆抗体; ELISA;
D O I
10.13343/j.cnki.wsxb.2005.01.026
中图分类号
S944 [贝类病害、敌害及其防治];
学科分类号
0906 ;
摘要
利用蔗糖密度梯度离心技术从自然发病的栉孔扇贝 (Chlamysfarrreri)组织分离纯化急性病毒性坏死症(Acutevirusnecrobioticdisease,AVND)病毒 ,并以此为抗原免疫Balb c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与NS1骨髓瘤细胞进行融合 ,最终筛选出 4株能稳定传代并分泌该病毒特异性单克隆抗体 (MonoclonalAntibody ,MAb)的杂交瘤细胞系。应用胶体金标记免疫电镜技术在超微水平上对这 4株MAbs进行测定表明 ,它们对AVND病毒均具有高度的特异性 ,并且所识别的特异性位点均位于病毒粒子囊膜的纤突上。应用该单克隆抗体对不同养殖季节的一龄贝进行间接ELISA检测发现 ,7月中旬至 7月底病毒感染率与感染强度均处于当年的最高峰 ,与这一时期栉孔扇贝所表现出的最高死亡率完全吻合
引用
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