河北省奶牛牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定

被引:20
作者
赵月兰 [1 ]
杨汉春 [1 ]
左玉柱 [2 ]
秦建华 [2 ]
刘占民 [3 ]
范京惠 [2 ]
张宁 [4 ]
机构
[1] 中国农业大学动物医学院
[2] 河北农业大学动物科技学院
[3] 河北农业大学中兽医学院
[4] 河北省畜牧兽医研究所
基金
国家科技攻关计划;
关键词
奶牛; 牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BVDV/MDV); ELISA; RT-PCR; 分离鉴定;
D O I
暂无
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
摘要
从河北省某规模化奶牛场牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)疑似病例中采集病料,将处理好的病料接种MDBK细胞,盲传9代,得到了不产生细胞病变的病毒。琼脂扩散试验表明本病毒能与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)OregonC24标准阳性血清反应,出现沉淀线;细胞培养物用BVD/MD荧光抗体染色检测,可见到荧光着染的特异性细胞,荧光颗粒出现于胞浆中。双抗体夹心ELISA检测病毒抗原结果BVDVOregonC24VP/N为3.141,分离毒P/N为3.012,P/N>2,与BVDVOregonC24V结果一致;电镜观察到圆形、直径为40~60nm,有囊膜,囊膜表面有突起的病毒粒子,与BVDV颗粒基本一致。经RT-CR检测,扩增出了唯一的315bp的目的条带,进一步证实为牛病毒性腹泻/粘膜病病毒。
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