基于小肠M细胞模型研究黄连多糖对小檗碱经小肠吸收的影响及相关机制

目的基于肠道M细胞模型,研究黄连多糖对小檗碱经小肠吸收的影响及相关机制,为研究中药多糖类成分影响活性成分吸收机制奠定基础。方法以Caco-2细胞与淋巴细胞分别构建小肠Caco-2细胞单层膜模型与小肠M细胞模型;考察不同浓度黄连多糖溶液(浓度分别为20、40和80μg·m L-1)分别对小檗碱经两种小肠细胞模型转运的影响;以荧光素经小肠细胞模型吸收的Papp值反映黄连多糖对小肠细胞通透性的影响;以Western blot法检测紧密连接蛋白ZO-1的表达水平,分析黄连多糖对小肠细胞模型完整性的影响。结果成功构建小肠Caco-2细胞单层膜模型与小肠M细胞模型;在小肠M细胞模型中,黄连多糖溶液浓度与小檗碱转运率和细胞膜通透性成正相关、与紧密连接蛋白ZO-1表达水平成负相关。当黄连多糖溶液总糖浓度为80μg·m L-1时,小檗碱转运率、细胞膜通透性以及紧密连接蛋白ZO-1表达水平与空白对照组间差异均有统计学意义（P <0.05或P <0.001）;在小肠Caco-2细胞单层膜模型中,黄连多糖对小檗碱的转运率、细胞膜通透性以及紧密连接蛋白ZO-1的表达均没有显著影响（P> 0.05）。结论黄连多糖可通过增加细胞膜通透性和降低紧密连接蛋白ZO-1的表达来促进小檗碱经小肠M细胞模型的转运,推测这可能与黄连多糖经M细胞摄取后对小肠相关免疫的调节作用有关。