荧光定量PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌

被引:11
作者
马晓燕
张会彦
贾春凤
李慧
王羽
张先舟
张伟
机构
[1] 河北农业大学食品科技学院
关键词
荧光定量PCR; 检测; 单核细胞增生性李斯特氏菌; 锁定寡核苷酸;
D O I
10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.15.115
中图分类号
R155.5 [食品卫生与检验];
学科分类号
摘要
[目的]建立一种快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的实时荧光定量PCR方法。[方法]针对单核细胞增生性李斯特氏菌的特异基因hlyA,结合锁定寡核苷酸(LNA),设计引物和探针,利用阳性质粒和模拟标本建立单核细胞增生性李斯特氏菌实时定量荧光PCR检测方法。[结果]以单核细胞增生性李斯特氏菌为模板克隆了hlyA基因,得到阳性质粒,并进一步建立了荧光定量PCR方法,得到标准曲线Y=-3.273 X+37.640,相关系数R2=1.000;该方法的灵敏度可以达到1.2×10 CFU/ml;人工污染猪肉检出限可以达到3.2×102 CFU/ml。[结论]建立了快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的实时荧光定量PCR方法,为实现食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的快速检测构建了一个技术平台。
引用
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页码:9274 / 9276
页数:3
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