巨噬细胞条件培养基神经营养活性成分的分离、纯化和鉴定

用快速自动比色微量分析法检测巨噬细胞条件培养基(MΦCM)对体外培养的生后7d SD大鼠小脑皮质神经元的作用。结果表明,MΦCM内分子量大于30kD的组分(加入量40μl/孔)对神经元(细胞密度1×10～5/孔)具有明显的神经营养活性,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。盖片培养法证明,此组分还具有促神经元突起生长的作用。另外,把MΦCM进行Sephadex G-100凝胶层析及生物活性鉴定,获得具有神经营养活性的第一峰洗脱液。降此洗脱液及上述MΦCM分子量大于30kD的组分经SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析,证明MΦCM中含有支持神经元生存和增强其活性作用的成分,是一种分子量为97.9kD的蛋白质。