副溶血弧菌不耐热溶血毒素的表达与纯化

被引：1

作者：

李志峰

聂军

戴迎春

李建栋

陈清

俞守义

机构：

[1] 第一军医大学流行病教研室

来源：

中国公共卫生 | 2004年 / 01期

关键词：

副溶血弧菌; 不耐热溶血毒素; 包涵体; 纯化蛋白;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378.3 [弧菌];

学科分类号：

摘要：

目的　表达和纯化融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素。方法　将表达载体 pET3 2a + -tlh转化大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,诱导表达副溶血弧菌不耐热溶血毒素 ,表达产物用聚丙稀酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)鉴定 ,8mmol/L的尿素溶解包涵体 ,用 6×his组氨酸蛋白质镍亲和层析树脂亲和层析纯化目的蛋白。结果　诱导表达的目的蛋白以包涵体形式存在 ,其含量约占菌体总蛋白的 10 % ,纯化获得了高纯度的融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素。结论　转化有重组质粒pET3 2a + -tlh的BL2 1(λDE3)可稳定高效地表达目的蛋白 ,采用低浓度的咪唑、β -巯基乙醇和Tritonx -10 0等方法减少杂蛋白污染 ,亲和层析纯化目的蛋白 ,可获得高纯度的目的蛋白

引用

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