多花蔷薇总RNA提取方法

被引：11

作者：

赵小兰

苏晓华

赵梁军

机构：

[1] 中国农业大学观赏园艺与园林系

[2] 中国林业科学研究院林业研究所

[3] 中国农业大学观赏园艺与园林系北京

[4] 湖北民族学院生物科学与技术学院

[5] 恩施

[6] 北京

来源：

中国生物工程杂志 | 2005年 / 09期

关键词：

多花蔷薇(Rosa multiflora); RNA提取; LiCl-尿素法; CTAB/酸酚法;

D O I：

10.13523/j.cb.20050919

中图分类号：

S685.12 [蔷薇、玫瑰、月季];

学科分类号：

090706 ;

摘要：

根据总RNA完整性、纯度和得率筛选出适合多花蔷薇幼嫩根、叶总RNA的提取方法。结果表明,以CTAB/酸酚法提取的扦插苗根系总RNA、以LiCl-尿素法提取的扦插苗根、叶总RNA以及采用RNeasyPlantMiniKit试剂盒的改进方法提取的组培苗嫩叶总RNA电泳有清晰明亮的28S、18S条带,无降解;其A260/A280值为1.73～2.04,表明总RNA质量好。RT-PCR结果进一步证实所提取的总RNA能够用于分子生物学的各种下游实验。RNA得率分别为:根系和组培苗嫩叶120-140μg/g(fw),扦插苗嫩叶190-230μg/g(fw)。CTAB/酸酚法提取的嫩叶总RNA、SDS/酸酚法提取的根、叶总RNA有多糖污染,且有明显降解。TotalRNAisolationsystem(Z5111,Promega)试剂盒不适合提取多花蔷薇各组织总RNA。

引用

页码：89 / 93

页数：5

共 13 条

[1]

Identification ofR2 gene homologous DNA fragments genetically linked to disease resistance loci in Arabidopsis thaliana. Aarts M G M,Lintel Hekkert B,Holub E B,et al. Mol PlantM icrobe Interact . 1998

[2]

Analysis of gene expression in rose petals using expressed sequence tags. Channeliere S,R iviere S,Scalliet G,et al. FEBS Letters . 2002

[3] 4种蔷薇属植物叶片黄酮含量的季节性变化 [J].

蒋辉 ;

何永华 ;

曹亚玲 ;

王明奎 ;

龙远德 .

天然产物研究与开发, 2000, (03) :58-63

[4]

Isolation of nucleic - acids from plants by differential solvent precip itation. Manning K. Analytical Biochemistry . 1991

[5]

Tolerance to crown gall differs among genotypes of rose rootstocks. Reynders A S,Pelloli G,Bettachini A,et al. HortScience . 1998

[6]

An Improved method for isolating RNA from dehydrated and nondehydrated chili pepper ( Capsicum annuum L. ) plant tissues. Yolanda M,Camacho V,Neftali O A,et al. Plant Molecular Biology Reporter . 2002

[7]

In vitro testing of rose rootstocks resistance to crown gall disease. Zhou L,Suzuki K,Naruse T,et al. Journal of the Japanese Society forHorticultural Science . 2000

[8]

Cloning and expression of 1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase cDNA from rosa ( Rosa x hybrida )[J] . D. Wang,J. Fan,R. S. Ranu. &nbspPlant Cell Reports . 2003 (6)

[9]

An improved method for isolating RNA from dehydrated and nondehydrated chili pepper (Capsicum annuum L.) plant tissues[J] . Yolanda Camacho-Villasana,Neftali Ochoa-Alejo,Linda Walling,Elizabeth Bray. &nbspPlant Molecular Biology Reporter . 2002 (4)

[10] 萝卜总RNA提取与mRNA差异显示技术 [J].

黄浩 ;

柳李旺 ;

龚义勤 ;

陈崇顺 ;

宋贤勇 ;

朱献文 .

植物生理学通讯, 2004, (04) :483-486

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