多花蔷薇总RNA提取方法

被引：11

作者：

赵小兰

苏晓华

赵梁军

机构：

[1] 中国农业大学观赏园艺与园林系

[2] 中国林业科学研究院林业研究所

[3] 中国农业大学观赏园艺与园林系北京

[4] 湖北民族学院生物科学与技术学院

[5] 恩施

[6] 北京

来源：

中国生物工程杂志 | 2005年 / 09期

关键词：

多花蔷薇(Rosa multiflora); RNA提取; LiCl-尿素法; CTAB/酸酚法;

D O I：

10.13523/j.cb.20050919

中图分类号：

S685.12 [蔷薇、玫瑰、月季];

学科分类号：

090706 ;

摘要：

根据总RNA完整性、纯度和得率筛选出适合多花蔷薇幼嫩根、叶总RNA的提取方法。结果表明,以CTAB/酸酚法提取的扦插苗根系总RNA、以LiCl-尿素法提取的扦插苗根、叶总RNA以及采用RNeasyPlantMiniKit试剂盒的改进方法提取的组培苗嫩叶总RNA电泳有清晰明亮的28S、18S条带,无降解;其A260/A280值为1.73～2.04,表明总RNA质量好。RT-PCR结果进一步证实所提取的总RNA能够用于分子生物学的各种下游实验。RNA得率分别为:根系和组培苗嫩叶120-140μg/g(fw),扦插苗嫩叶190-230μg/g(fw)。CTAB/酸酚法提取的嫩叶总RNA、SDS/酸酚法提取的根、叶总RNA有多糖污染,且有明显降解。TotalRNAisolationsystem(Z5111,Promega)试剂盒不适合提取多花蔷薇各组织总RNA。

引用

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