WO-1对成骨细胞的生物学效应研究

目的了解W O-1在体外环境中对人成骨细胞增殖、分化的影响,为骨组织工程学研究提供更多的方法。方法采用培养人胚成骨细胞,以生长曲线和3H-T dR法分析W O-1与成骨细胞生物学效应的量效关系,在最佳作用浓度下,以接种细胞克隆形成率,流式细胞技术分析细胞周期,透射电镜观察细胞形态学,了解W O-1对细胞活性和细胞增殖的影响;以ALP活性检测,3H-P ro line掺入实验,放射免疫法测骨钙素合成及I型胶原和骨钙素mRNA的表达等,从蛋白质和mRNA两个水平观察W O-1对细胞功能的影响。结果W O-1在高浓度时对人胚成骨细胞增殖有抑制作用,低浓度时对人胚成骨细胞增殖有促进作用,最佳作用浓度8μg/m l,在0.25～8μg/m l浓度范围内存在量效关系。在8μg/m lW O-1作用下,实验组人胚成骨细胞接种克隆形成率增加,克隆体积增大;群体倍增时间明显缩短,电镜下见细胞器较对照组发达;而ALP活性、Ⅰ型胶原合成、骨钙素合成等,在蛋白质及mRNA两个水平均有增加,且与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度W O-1,可促进体外培养的人胚成骨细胞活性及增殖,加强细胞合成Ⅰ型胶原、骨钙素等基质的功能,可用作成骨细胞增殖及分化的促进剂。