抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

被引：16

作者：

户义

刘雪松

朱勇

刘莹

许晓光

薛江楠

金伯泉

机构：

[1] 第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2003年 / 02期

关键词：

Ig融合蛋白; 单克隆抗体; 表位; 亲和层析;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.003080

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

摘要：

目的 :制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体 (mAb) ,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法 :以hBCMA Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠 ,通过细胞融合制备抗Fc段mAb ,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性 ,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法 ;Westernblot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联 ,制备亲和层析柱 ,对LAIR1 Ig融合蛋白进行纯化。结果 :获得 7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤 (FMUFc1～FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb ,FMUFc5作为酶标记mAb ,成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法 ,敏感度达到 2 μg/L ;在 7株mAb中 ,FMUFc6可用于Ig融合蛋白的Westernblot检测。用FMUFc6mAb制备的亲和层析柱 ,可有效地纯化LAIR1 Ig融合蛋白。结论 :成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb ,建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法 ,为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段

引用

页码：170 / 171+175 +175

页数：3

共 5 条

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