用酵母双杂交系统分离一个新的人类细胞凋亡诱发基因

被引:8
作者
齐兵
齐义鹏
M.Yutsudo
刘青珍
机构
[1] 武汉大学病毒学研究所!武汉
[2] Research Institute for Microbial Diseases Osaka University!Osaka
[3] Japan
[4] 武汉大学病毒学研究所!武汉
关键词
asy基因; asyip基因; 细胞凋亡; 酵母双杂交系统; 人肺细胞cDNA文库;
D O I
暂无
中图分类号
Q255 [细胞的衰老与死亡];
学科分类号
摘要
asy基因是最近发现的一个新的凋亡诱发基因,但其诱发凋亡的机制仍不清楚. 采用酵母双杂交系统,从人肺细胞系(WI-38)cDNA文库中克隆了一个asx相互作用蛋白 基因asyip(asy interacting protein). asyip在人的各种组织内均能组成型转录合成 1.8和 2.7 kb两种 mRNA转录本,但转录水平有明显差异,在脑组织中转录水平最高.而且, 脑组织中 2.7 kb mRNA转录水平大大高于 1.8 kb的转录本.序列分析表明两种转录本起 始于一个共同的 5’端,但 3’端加 poly(A)位点不同.两者共享一个大的可读框,编码 26 ku的蛋白ASYIP.推论的氨基酸一级结构表明,ASYIP含有两个大的强疏水区、两个蛋 白激酶C磷酸化位点和两个酪蛋白激酶磷酸化位点.C端具有一个内质网捕获信号 (Lys-Lys-Lys-Ala-Glu).免疫沉淀试验进一步验证ASYIP和ASY在哺乳动物细胞中可 以相互结合.与asy基因一样,asyip基因的大量表达能抑制肿瘤细胞Saos-2的生长,诱 发细胞凋亡,但效率比asy低.
引用
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页数:10
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