粗壮女贞RAPD-PCR实验体系优化的研究

被引：5

作者：

鄢东海 ^{[1
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郑道君 ^{[2
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梁远发 ^{[1
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令狐昌弟 ^{[1
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刘国民 ^{[2
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田永辉 ^{[1
]}

机构：

[1] 贵州省茶叶科学研究所

[2] 海南大学苦丁茶研究所

来源：

贵州科学 | 2007年 / 02期

关键词：

苦丁茶; 粗壮女贞; RAPD; 反应体系;

D O I：

暂无

中图分类号：

S571.1 [茶];

学科分类号：

0902 ; 090203 ;

摘要：

以粗壮女贞嫩芽为材料,对粗壮女贞RAPD分析中一些重要影响因素,包括模板DNA浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq酶用量、退火温度、延伸时间以及循环次数等因子进行了比较系统的摸索和优化.建立了适合粗壮女贞RAP-PCRD分析的优化反应体系:即25μl反应体系中Mg2+浓度为2.5mM,dNTPs浓度为200μM,Taq酶用量为2.0U,引物浓度为10pmol,模板浓度为80ng.PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,37℃退火45s,72℃延伸120s,进行40个循环,最后于72℃延伸10min.以该优化的RAPD条件进行重复实验,其实验结果重现性良好.

引用

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页数：9

共 41 条

[1] 5种中国兰花RAPD反应条件的优化 [J].