基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌

被引：4

作者：

朱渊 ^{[1
]}

戴云山 ^{[2
]}

王俊虎 ^{[1
]}

王萍 ^{[1
]}

吕凤霞 ^{[3
]}

顾秋琴 ^{[1
]}

机构：

[1] 泰州市食品药品检验所

[2] 泰州市食品药品监督管理局

[3] 南京农业大学食品学院

来源：

微生物学通报 | 2019年 / 46卷 / 05期

关键词：

铜绿假单胞菌; 聚合酶螺旋反应; 等温扩增; DNA快速检测;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.180775

中图分类号：

TS207.4 [食品的微生物检验];

学科分类号：

摘要：

【背景】铜绿假单胞菌是一种重要的水源和食源性致病菌,可引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病。加强铜绿假单胞菌的快速检测,对保障食品安全具有重要的意义。【目的】建立聚合酶螺旋反应(Polymerasespiralreaction,PSR)方法快速检测铜绿假单胞菌。【方法】针对铜绿假单胞菌外毒素A调控基因——ETA基因(toxA)设计引物,通过引入加速引物、优化反应条件和筛选颜色指示剂,建立快速检测铜绿假单胞菌的PSR方法,并研究方法的特异性、敏感性和可靠性。【结果】建立的方法在等温65°C条件下,40 min内可完成PSR反应,且可通过钙黄绿素和羟基萘酚蓝直接判读结果。方法特异性强、灵敏度高,最低检出限分别为20 CFU/mL细菌和1.011 5 pg/μL基因组DNA。可视化PSR方法检测包装饮用水来源的分离菌株与传统生化方法检测结果一致。【结论】研究建立的可视化PSR方法为铜绿假单胞菌DNA快速检测提供了一种可行的有效手段。

引用

页码：1246 / 1256

页数：11

共 19 条

[1] 环介导等温扩增技术在食品中痢疾志贺氏菌快速检测 [J].