α3、α7-nAChRs缺损AD模型的建立及茶多酚的干预

目的　建立 β -Amyloidpeptides(Aβ)诱导α3 、α7-烟碱型胆碱能受体nAChRs受体亚型缺失AD病理模型 ,探讨Aβ的毒性作用机理 ,并观察茶多酚 (EGCG)的可能干预。方法　纳摩尔Aβ慢性处理PC12细胞建立α3 、α7亚单位缺失细胞模型。用MTT比色法、AnnexinV -FITC、配体结合实验、WesternBlot、RPA法深入探讨Aβ损伤α3 、α7nAChRs亚型的机制以及EGCG的保护作用。结果　用纳摩尔浓度Aβ1-40 和Aβ2 5-3 5能明显降低PC12细胞 [12 5I]α -Bungarotoxin和 [3 H]Epibatidine结合位点数量 ,α3 、α7亚单位蛋白和mRNA水平 ,但不诱导凋亡 ,却明显抑制MTT。而预先加入 10 μMEGCG几乎完全抑制Aβ对 [3 H]epibatidine和 [12 5I]α -BTX的结合力的影响 ,可显著抑制Aβ对α3 、α7nAChRs受体亚单位蛋白的损伤。结论Aβ诱导nAChRs缺损神经细胞模型 ,是目前较理想研究AD的细胞模型 ;EGCG可干预Aβ对nAChRs的神经毒性作用