家兔胚胎细胞核移植的研究

被引:6
作者
黄少华
靳瞻群
高昌恒
赵晓霞
蒙文柱
朱裕鼎
机构
[1] 中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室,中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室,中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室,中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室,中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室,中国农业科学院畜牧研究所动物生物工程室北京,北京,北京,北京,北京,北京
关键词
兔胚胎; 显微操作; 电融合; 细胞核移植;
D O I
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学科分类号
摘要
以兔8-16细胞的新鲜胚胎或冷冻-解冻胚胎的卵裂球作为细胞核供体,成熟的去核卵母细胞作为细胞核受体。经显微操作,将分离的单个卵裂球移入去核卵母细胞透明带内,制成322枚组合卵。对组合卵施加一个1200伏/cm(V/cm)和80微秒(μs)的直流电脉冲,使卵裂球的细胞核导入去核卵母细胞之中。由新鲜供体胚胎或冷冻-解冻供体胚胎与去核卵母细胞构成的组合卵的融合率分別为87.2%(251/288)和73.5%(25/34)。将部分已融合的细胞核移植(Nticlear Transplantation,NT)卵置于含10%胎犊血清(FCS)的TCM199培养液中,在充以5%CO2+空气的培养箱内,于39℃下培养20小时,新鲜供体胚胎和冷冻-解冻供体胚胎的NT卵发育至2-4细胞的分裂率分别为58.0%(47/81)和53.8%(7/13)。将53枚NT卵移入同步发情的5只受体母兔的输卵管内,结果一只母兔于妊娠笫33天经剖腹手术产出1只体重为70克雌性核移植仔兔。实验结果表明兔8-16细胞阶段的新鲜胚胎和冷冻-解冻胚胎均可在细胞核移植中用作细胞核供体。
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