Exendin-4的表达及其降糖活性研究

被引：8

作者：

祖向阳 ^{[1
]}

张贵星 ^{[2
]}

陈小让 ^{[2
]}

王小纯 ^{[1
]}

机构：

[1] 河南农业大学生命科学学院

[2] 郑州大学医学院

来源：

药物生物技术 | 2009年 / 16卷 / 04期

关键词：

Exendin-4; 基因改造; 表达; 血糖浓度;

D O I：

10.19526/j.cnki.1005-8915.2009.04.006

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

根据GeneBank中登录的Exendin-4的氨基酸序列(AAB22006),结合大肠杆菌的密码子偏嗜性,对原有基因70%的密码子进行改造,使其在大肠杆菌中高效表达;同时添加KpnI和NcoI酶切位点和肠激酶识别位点,构建成重组表达载体pET-32a(+)-Exendin-4,转化大肠杆菌BL21(DE3)。在30℃条件下1mmol/L的IPTG诱导表达6h,融合蛋白表达量占细菌蛋白总量的32%。利用亲和层析纯化融合蛋白,每克湿菌体可获得纯度98%的融合蛋白6.44mg。利用肠激酶切除融合蛋白的N端融合部分,用亲和层析吸附N端融合肽,每克湿菌体可获得纯度99%的Exendin-41.59mg。腹腔注射糖尿病基因小鼠(BKS.Cg-m+/+Leprdb/J鼠),血糖浓度下降极显著,最佳用量为7μg/kg,注射后4h血糖降低达51.93%。

引用

页码：316 / 320

页数：5

共 4 条

[1]

Exendin-4的研究进展 [J].