中华绒螯蟹血淋巴内盐酸环丙沙星的反相高效液相色谱法的建立

应用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)建立了盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹血淋巴内含量的测定方法。本法采用肌肉注射的给药方法 ,给药剂量为 8.17± 0 .5 6mg·kg-1和 6 .2 5± 0 .85mg·kg-1。血淋巴从心区抽取。经各种抗凝方法的比较 ,认为等量的ACD与等量的血淋巴混合 ,可得到持久的抗凝效果。血淋巴样经甲醇去蛋白 ,30 0 0r/min离心 10min后 ,取上清液上HPLC。色谱柱 ,RP ODS 5μ15 0× 4.6mm ;流动相 ,甲醇 磷酸缓冲液 四丁基溴化铵 =2 5 0∶75 0∶2 0 (v /v /v) ;流速 ,1mL·min-1;进样量 ,2μL ;检测波长 ,2 80nm。研究表明 ,本法线性关系与重复性良好 ;雌、雄蟹平均回收率分别为 10 0 .0 8± 3 .43%和 99.11± 8.2 0 % ;日间精密度、平均提取精密度分别为 1.19± 0 .92 %、1.5 5± 0 .0 1%。用该方法对肌肉注射给药后 48h内中华绒螯蟹雄蟹血淋巴中的盐酸环丙沙星的血药浓度进行检测 ,揭示出由 37.13± 0 .0 8μg·mL-1降至 5 .96± 0 .18μg·mL-1的代谢规律。