双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分

被引：13

作者：

汪永信 ^{[1
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安虹 ^{[1
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程坚 ^{[1
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程潇 ^{[1
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刘娟娟 ^{[1
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张波 ^{[1
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机构：

[1] 国家农副加工食品质量监督检验中心

[2] 安徽国家农业标准化与监测中心

来源：

生物技术通报 | 2012年 / 01期

关键词：

双重实时荧光PCR; 细胞色素b基因; 鸡源性成分; 内参照; 检测方法;

D O I：

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.01.020

中图分类号：

TS207 [食品标准与检验]; S816.17 [饲料检验方法];

学科分类号：

083201 ; 090502 ;

摘要：

根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、兔、驴、鹿、狗、马、鸽子、大豆、玉米、小麦、大米、马铃薯及番茄的线粒体DNA作为模板进行特异性试验,结果表明该方法仅能特异性扩增鸡源性成分,而对其它物种未见有效扩增。通过灵敏度测试,该方法检出限达0.01%。所制定的方法特异性高,灵敏度好,可以作为食品和饲料中鸡源性成分的高效检测方法。

引用

页码：134 / 138

页数：5

共 8 条

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