利用荧光RT-PCR法检测环境水体中诺如病毒

被引：3

作者：

李巧艳 ^{[1
,2
]}

吴新伟 ^{[1
,2
,3
]}

刘于飞 ^{[2
]}

伍业健 ^{[2
]}

高国全 ^{[1
,3
]}

杨霞 ^{[1
,3
]}

机构：

[1] 中山大学中山医学院生物化学教研室

[2] 广州市疾病预防控制中心

[3] 中山大学海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室

来源：

中国卫生检验杂志 | 2011年 / 21卷 / 02期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

诺如病毒; 环境水体; 病毒浓缩; 实时定量RT-PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

R123.1 [水的卫生标准和水的卫生监测];

学科分类号：

100402 ;

摘要：

目的:建立一种快速敏感的方法检测环境水体中的诺如病毒。方法:选择诺如病毒阳性的粪便标本,10倍梯度稀释,模拟被污染水体,用16%聚乙二醇8000-0.525mol/L NaCl溶液浓缩病毒,用实时定量RT-PCR检测病毒核酸。结果:重组质粒标准品做标准曲线,标准品拷贝数的对数（x）与Ct值的关系为Ct=39.886-3.485x,相关系数R2=0.995,灵敏度为100拷贝,比普通RT-PCR高1个数量级,比ELISA高3个数量级,重复性佳,回收率在14%44%之间,随着样品中NV浓度降低而下降,。用实时定量RT-PCR、常规RT-PCR和ELISA方法检测了42份现场水样,阳性率分别为40%、24%和0。结论:为环境水体中诺如病毒的检测提供了一种灵敏、可行的定量检测方法。

引用

页码：382 / 385

页数：4

共 9 条

[1] 水及水产品诺如病毒快速检测技术研究 [J].

肖锦晖 ;

雷蕾 ;

余光清 ;

吴振宏 ;

郑晓晨 .

中国卫生检验杂志, 2010, 20 (06) :1324-1325+1328

[2] 水中诺如病毒富集及定量检测研究 [J].

周晓红 ;

李晖 ;

杨杏芬 ;

柯昌文 ;

陈传德 ;

郑焕英 ;

周惠琼 ;

陈秋霞 ;

邹丽容 .

热带医学杂志, 2010, 10 (02) :137-140

[3] 水体中病毒浓缩方法及其条件优化 [J].

寇晓霞 ;

吴清平 ;

姚琳 ;

张菊梅 .

微生物学通报, 2009, 36 (01) :25-30

[4] 金华市首起诺如病毒感染性腹泻Real-Time RT-PCR检测 [J].

陈志清 ;

卢亦愚 ;

王鸽 ;

吴国平 .

中国卫生检验杂志, 2008, (11) :2410-2411

[5] 广州市群体性食物中毒事件中诺如病毒分子流行病学分析 [J].

吴新伟 ;

杨霞 ;

蒋力云 ;

沈纪川 ;

谢华萍 ;

李向忠 ;

伍业健 ;

刘于飞 ;

高国全 .

中山大学学报(医学科学版), 2008, (04) :486-489

[6] 诺如病毒感染国内外研究概况 [J].

徐友富 ;

童贻刚 ;

茹志涛 ;

史套兴 ;

周育森 .

中国卫生检验杂志, 2008, (05) :949-951

[7] 环境水体中肠道病毒浓缩方法的比较 [J].

张崇淼 ;

刘永军 ;

王晓昌 ;

薛小平 ;

王春 .

中国给水排水, 2007, (07) :36-39

[8] 贝类海产品中诺如病毒快速检测方法研究 [J].

李晖 ;

黄吉成 ;

方苓 ;

严纪文 ;

邹丽容 ;

陈秋霞 ;

黄平 .

中国卫生检验杂志, 2006, (11) :1300-1302

[9]

Establishment of a fluorescent polymerase chain reaction method for the detection of the SARS-associated coronavirus and its clinical application[J]. 吴新伟,程钢,狄飚,尹爱华,何蕴韶,王鸣,周新宇,何丽娟,罗凯,杜琳.Chinese Medical Journal. 2003(07)

← 1 →