抗rhEPO单克隆抗体的制备及初步应用

被引：4

作者：

汪燕芳

彭进

蔡引凤

倪亚明

赵建阳

成国祥

机构：

[1] 同济大学生命科学与技术学院

[2] 上海转基因研究中心

[3] 上海转基因研究中心上海

[4] 上海

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2004年 / 06期

关键词：

重组人促红细胞生成素; 单克隆抗体; 免疫亲和层析;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.003656

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的 :研制抗人促红细胞生成素的特异性单克隆抗体 (mAb) ,对其生物学特性进行初步鉴定 ,并用于转基因羊乳中重组人促红细胞生成素 (rhEPO)的提纯。方法 :以自制的rhEPO粗品免疫BALB/c小鼠 ,制备抗rhEPO的mAb。以Westernblot和间接ELISA法 ,对所获mAb进行初步鉴定。以纯化的mAb同预活化的Sepharose 4B偶联 ,制得mAb亲和层析柱 ,并用于转基因羊乳中rhEPO的提纯。结果 :获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞株 (1E7和 2E6 )。Ig亚类 (型 )的鉴定分别为IgG1和IgG2b ,轻链均为κ型。用Westernblot证实 ,获得的mAb可特异性地识别rhEPO。用自制的免疫亲和层析柱用于转基因羊乳中rhEPO的提纯 ,具有很好的吸附作用 ,回收率达 70 %。结论 :成功地获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞。用自制的免疫亲和层析柱提纯转基因羊奶中的rhEPO具有较高的吸附效率

引用

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共 4 条

[1] 抗重组人白细胞介素18单克隆抗体的制备与特性研究 [J].