高亲和力莱克多巴胺单克隆抗体的研制及ciELISA检测方法的建立

被引：4

作者：

张海棠 ^{[1
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王自良 ^{[1
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邓瑞广 ^{[2
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张改平 ^{[2
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范国英 ^{[1
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姜金庆 ^{[1
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机构：

[1] 河南科技学院动物科学学院

[2] 河南省动物免疫学重点实验室

来源：

中国生物工程杂志 | 2009年 / 29卷 / 01期

关键词：

莱克多巴胺; 人工抗原; 单克隆抗体; 竞争ELISA; 快速检测试剂盒;

D O I：

10.13523/j.cb.20090110

中图分类号：

S859.84 [动物性食品中化学物残留];

学科分类号：

摘要：

用混合酸酐法(MA)将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用UV和SDS-PAGE鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/c小鼠,细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb;应用RAC mAb研制RAC残留快速检测ciELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol;RAC-Kit的检测限为0.5ng/ml,检测范围为0.5～151ng/ml,饲料样、猪尿样的平均添加回收率为87.2%,89.4%,平均批内和批间变异系数小于15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR%)为9.7%,与其它化合物无CR,RAC-Kit在4℃保存期为180d。

引用

页码：50 / 55

页数：6

共 6 条

[1] 邻氯青霉素单克隆抗体的制备及特性鉴定 [J].