黄连素对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的研究黄连素(BBR)对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以高脂饮食喂养并注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型。将模型动物分为实验组和对照组,同时以正常SD大鼠设立空白组,实验组予以高、中、低剂量黄连素灌胃,对照组和空白组予以等黄连素体积的双蒸水灌胃,治疗周期为12周。酶联免疫吸附法(ELISA)和硝酸酶还原法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量;实时荧光定量(RT-qPCR)检测Calpain1和Calpain2 mRNA表达水平;蛋白印记实验检测Cleaved-Caspase 3、Bcl-2、Bax、Calpain1及Calpastatin相对蛋白表达量。结果①与空白组相比,对照组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著上升(P<0.05);与对照组相比,3种剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均有不同程度下降(P<0.05)。②与空白组相比,对照组Calpain1 mRNA相对水平明显升高(P<0.01),Calpain2 mRNA无明显变化;与对照组相比,高、中、低剂量实验组Calpain1 mRNA相对水平呈剂量依赖性降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而Calpain2无明显变化。③与空白组相比,对照组大鼠心肌组织Calpain1蛋白表达量增多(P<0.01),而Calpastatin蛋白表达明显下降(P<0.01);与对照组相比,实验组大鼠心肌组织Calpastatin蛋白表达明显增多(P<0.05或P<0.01),而Calpain1蛋白表达显著下降(P<0.01),并呈剂量依赖性。④与空白组相比,对照组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达量明显降低(P<0.01),而Bax和Cleaved-Caspase 3表达升高(P<0.01);与对照组相比,实验组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达增多,Bax和Cleaved-Caspase 3蛋白表达明显下降,并呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄连素能降低冠心病大鼠心肌细胞凋亡,该作用可能与增强Calpain1蛋白表达和活性,下调血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平有关。