节杆菌BT801基因文库构建及其乙内酰脲酶基因分离与表达

被引:9
作者
郝淑凤
张惟材
袁红杰
王恒梁
黄留玉
机构
[1] 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所 北京
[2] 中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳,北京,北京,北京,北京
关键词
乙内酰脲酶; 节杆菌; 基因文库; 基因表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q782 [基因载体];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
L 乙内酰脲酶产生菌节杆菌BT80 1的染色体DNA经Sau3AI部分酶切后分离 30kb左右的片段 ,与经HpaI和PstI酶切的黏粒载体pKC5 0 5进行连接 ,将连接产物用包装蛋白包装 ,转染大肠杆菌DH5α得到 10 0 0 0多个转化子 ,构建成节杆菌BT80 1的基因组文库。通过薄层层析等方法筛选得到了 1个阳性克隆 ,通过亚克隆得到了乙内酰脲酶的完整基因 ,该基因能分别利用自身的启动子和T5启动子在大肠杆菌中进行表达产生有活性的蛋白
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