小桐子基因组DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化

被引：25

作者：

欧文军 ^{[1
]}

李开绵 ^{[1
]}

王文泉 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

[2] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

来源：

中国农学通报 | 2008年 / 05期

关键词：

小桐子; DNA提取; ISSR反应体系; 正交设计; 优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S794.9 [其他];

学科分类号：

090702 [森林培育];

摘要：

为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA,采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高,可作为ISSR分子标记的模板。同时,采用正交设计的方法,对影响小桐子ISSR-PCR反应体系中的4个因素(引物、Taq DNA Polymerase、10×Buffer(含Mg2+)、dNTPs)在3个水平上进行优化试验。建立了适合小桐子的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR最优反应体系,即20μl的反应体系中含有30ng模板DNA、0.2mmol/L dNTP、0.3 U Taq酶Polymerase、0.8μmol/L Primer、3.0mmol/L10×Buffer(含Mg2+)。

引用

页码：409 / 413

页数：5

共 20 条

[1]

杨树ISSR反应体系的建立及正交设计优化 [J].