柑桔溃疡病菌实时荧光定量PCR检测与应用

被引：28

作者：

殷幼平 ^{[1
]}

黄冠军 ^{[1
]}

赵云 ^{[1
]}

刘洪 ^{[2
]}

王中康 ^{[1
]}

机构：

[1] 重庆市基因功能及调控重点实验室重庆大学生物工程学院

[2] 重庆市农业技术推广总站植保植检站

来源：

植物保护学报 | 2007年 / 06期

关键词：

柑桔溃疡病菌; 定量PCR; 荧光染料; TaqMan探针; 检测;

D O I：

10.13802/j.cnki.zwbhxb.2007.06.016

中图分类号：

S436.66 [柑桔类病虫害];

学科分类号：

090401 ; 090402 ;

摘要：

根据地毯草黄单孢Xac306菌株(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac306)已知全基因组中独有蛋白基因序列设计的特异性引物对和探针,建立并优化SYBR Green I(SGI)荧光染料和Taq-Man探针实时荧光定量PCR检测体系,用于柑桔溃疡病早期诊断鉴定。结果表明,建立的两种定量PCR体系均能特异地检出Xac的细胞和其基因组DNA,而对其它测试的植物病原菌和柑桔表面的腐生黄单孢菌都不能检出。SGI法和TaqMan探针法对Xac细菌悬浮液的检测灵敏度均可达到1～5个细菌/反应,对Xac靶标片段DNA的检测灵敏度可达1fg/μL。两种定量PCR检测方法比常规PCR灵敏度高2～3个数量级。对田间采集的328个柑桔显症、疑似症状和无症带菌材料富集培养样品进行了实际检测,结果表明,实时荧光PCR适合柑桔无症带菌样品的早期检测。

引用

页码：607 / 613

页数：7

共 3 条

[1] PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术 [J].

孙宪昀 ;

王中康 ;

周常勇 ;

夏玉先 .

西南农业大学学报(自然科学版), 2004, (02) :148-150+154

[2] 柑桔溃疡病菌PCR快速检验检疫技术研究 [J].

王中康 ;

孙宪昀 ;

夏玉先 ;

周常勇 ;

殷幼平 .

植物病理学报, 2004, (01) :14-20

[3]

Gene quantification using real-time quantitative PCR[J] . David G Ginzinger.Experimental Hematology . 2002 (6)

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