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扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达
被引:3
作者:
刘玉方
陈玉梅
蔡金科
机构:
[1] 中国科学院微生物研究所
[2] 中国科学院微生物研究所 北京
[3] 北京
[4] 北京
来源:
关键词:
扣囊拟内孢霉;
α-淀粉酶;
亚克隆;
基因表达;
D O I:
10.13343/j.cnki.wsxb.1995.06.003
中图分类号:
Q933 [微生物遗传学];
学科分类号:
071007 ;
摘要:
以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。
引用
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页码:404 / 409
页数:6
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