表达血管生长抑制素的重组毕赤酵母在诱导阶段混合碳源的流加

被引:6
作者
谢静莉
周庆玮
张励
叶勤
辛利
杜鹏
甘人宝
机构
[1] 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
[2] 中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所
[3] 中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所 上海
[4] 上海
关键词
血管生长抑制素; 甘油流加; 溶氧; 巴斯德毕赤酵母;
D O I
10.13345/j.cjb.2003.04.018
中图分类号
TQ920 [一般性问题];
学科分类号
081703 ; 082203 ;
摘要
为进行高密度发酵并实现外源基因的高表达 ,在表型为MutS 的重组毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达人血管生长抑制素的诱导阶段 ,采用了甘油 甲醇混合补料的培养方式。以溶氧水平作为甘油代谢指针来控制甘油限制性流加既可维持一定菌体生长 ,又不会发生发酵液中残余甘油及有害代谢产物 (乙醇 )阻遏蛋白表达。当表达阶段的菌体平均比生长速率控制于 0 0 12h- 1 ,菌体浓度达 15 0g L ,血管生长抑制素浓度最高达到 10 8mg L ,血管生长抑制素的平均比生产速率为 0 0 2mg (g·h) ,菌体关于甘油的表观得率为 0 69g g ,菌体关于甲醇的表观得率为 0 93g g,较没有采用甘油限制性流加时都有所提高
引用
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